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显微镜的使用

发布日期:2010/11/27

 

    人的眼睛只能识别大小为0.1㎜的物体。显微镜是精密的放大仪器,是生物学研究不可缺少的工具。我们用它可以观察肉眼看不见的微小生物的结构。中学最常用的是光学显微镜,为了正确操作、妥善保管和维护显微镜,使之延长使用年限,我们必须首先了解显微镜的结构和功能。 一台显微镜包括机械装置和光学系统两大部分,注意比较和识别。 

一、显微镜的基本结构: 
  显微镜构造很复杂,种类很多,但基本结构是由机械和光学两大部分构成,现分述如下: 
1、机械部分: 
  它是为光学部分服务的部件,包括以下九部分: 
(1)、镜座:显微镜最下面呈马蹄形或园形的部分,起稳定和支持镜身作用。 
(2)、镜柱:从镜座向上直立的短柱。上连镜臂,下连镜座,可以支持镜臂和载物台。 
(3)、镜臂:弯曲成马蹄形的部分,便于手持,下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节,可使镜臂倾斜,便于观察。 
(4)、载物台:自镜臂下端向前伸出,放置标本用的平台,其中央有一个园孔,叫通光孔。台上有一移动器(老式的左右各有一个压片夹),用以固定和移动标本。 
(5)、镜筒:和镜臂上方连接的园筒部分。有的显微镜镜筒内有一抽管,可适当抽长,一般长度是160-170毫米。镜筒上端装有目镜,下端有一个可转动的园盘,叫物镜转换器(或叫物镜旋转盘,固着在镜筒下端,分两层,上层固着不动,下层可自由转动。转换器上有2~4个圆孔,用来安装不同倍数的低倍或高倍物镜)。作用是保护成像的光路与亮度。 
(6)、调节器(也叫调节螺旋):为镜壁上两种可转动的螺旋,一大一小,能使镜筒上下移动,调节焦距。大的叫粗准焦螺旋,位于镜臂的上方,可以转动,以使镜筒能上下移动,从而调节焦距,升降镜筒较快,用于低倍镜对焦;小的叫细准焦螺旋,位于镜臂的下方,它的移动范围较粗准焦螺旋小,升降镜筒较慢,可以细调焦距。 
(7)、倾斜关节:镜柱和镜臂交界处有一个能活动的关节。它可以使显微镜在一定的范围内后倾(一般倾斜不得超过45°)便于观察。但是在使用临时封片观察时,禁止使用倾斜关节,尤其是装片内含酸性试剂时严禁使用,以免污损镜体。 
(8)、载物台:从镜臂向前方伸出的金属平台。呈方形或圆形,是放置玻片标本的地方。其中央具有通光孔,在通光孔的左右有一个弹性的金属压片夹,用来压住载玻片。较高级的显微镜,在载物台上常具有推进器,它包括夹片夹和推进螺旋,除夹住切片外,还可使切片在载物台上移动。 
2、光学部分: 由目镜、物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。 
(1)、目镜:装于镜筒上方,由两组透镜构成,接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像。接目镜上刻有5×,8×,10×,15×,25×等符号,表示放大倍数。我们所观察到的标本的物像,其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。如接物镜是10×,接目镜是8×,其物像的放大倍数是10×8=80倍。 
  在接目镜内两个透镜间的光栏上可装一根剪短的毛发,做为指针,用以指示要观察的材料。 
(2)、物镜:装在镜筒下端物镜转换器的孔中,一般的显微镜有2~4个接物镜镜头,每个镜头都是由一系列的复式透镜组成的,其上也有放大倍数记号,有4×,10×,40×及100×。4×及10×接物镜是低倍镜,40×是高倍镜,100×是油镜。低倍镜常用于搜索观察对象及观察标本全貌,高倍镜则用于观察标本某部分或较细微的结构,油镜则常用于观察微生物或动植物更细微的结构。 
(3)、聚光器(集光器):位于载物台(通光孔)下方,由两块或数块镜组成,它能将反光镜反射来的光线集中以射入接物镜和接目镜,有的聚光器可升降,便于调光,集光器下有一可伸缩的园形光圈,叫虹彩光圈,可调集光器口径的大小和照射面,以调节光线强弱(有的显微镜只有遮光极而无集光器)。光线过强时,可缩小虹彩光圈。 
(4)、反光镜:是显微镜观察时获得光源的装置,位于显微镜镜座中央,一面为平面镜,一面为凹面镜。转动反光镜,可使外面光线通过集光器照射到标本上。使用时,光线强用平面镜,光线弱用凹面镜。 

显微镜的成像原理(放大原理) 

  光线→反光镜→遮光器→通光孔→标本(一定要透明)→物镜的透镜(第一次放大成倒立实像)→镜筒→目镜(再放大成虚像)→眼。 
物镜的作用:使被观察物体成一个倒立的放大的实像。像投影仪的镜头。 
目镜的作用:把物镜成的实像,再一次放大成虚像。像放大镜的镜头,把物体的像放大。 

二、显微镜的使用方法: 
1、取镜安放: 
  取镜  右手握住镜臂,左手平托镜座,保持镜体直立。(特别要禁止单手提着显微镜走,防止目镜从镜筒中滑脱)。 
  安放  放置桌边时动作要轻。一般应在身体的前面,略偏左,镜筒向前,镜臂向后,距桌边7~10 ㎝处,以便观察和防止掉落。安放目镜和物镜。
2、取好光源(调光):用显微镜观察标本前,先要取好光源。首先把显微镜放在自己左肩一侧台前,镜座距桌边约两寸,镜臂朝自己,镜筒朝外。用手转动物镜转换器,使低倍接物镜和镜筒成一直线,正对通光孔。用左眼从接目镜向下注视,同时用手拨动反光镜,让镜面对着光源,当看到园形镜界(视野)呈现光亮而均匀的时候即调好光了,如视野阴暗不明,则需再调节反光镜和集光器,直到视野明亮均匀为止。 
3、低倍镜的使用: 
  观察任何标本都必须先用低倍镜。 
  (1)放置切片  升高镜筒,把玻片标本放在载物台中央,标本材料正对通光孔的中心,用压片夹压住载玻片的两端。 
  (2)调焦  将要观察的玻片标本放在载物台通光孔的中央,玻片标本两端用压片夹夹紧,再用手沿顺时针方向旋转粗调节器,把镜筒徐徐降到接物镜头差不多接近玻片标本(约半厘米)为止(从侧面观察下降镜筒)。然后左眼观察,边观察边用调节器将镜筒徐徐上升(逆时针方向旋转粗调节器)直到发现物象,观察清晰为止。如果不够清楚,可用细准焦螺旋调节。(不可以在调焦时边观察边使镜筒下降,以免压碎装片和镜头。) 
  (3)低倍镜的观察  由所用的目镜放大倍数与物镜放大倍数相乘,即为原物被放大的倍数。如果物像不在视野中央,要慢慢移动到视野中央,适当再进行调节。 
4、高倍镜的使用 
  (1)选好目标  如果要观察视野内某部分更细微的结构,则需要用高倍镜观察。先用低倍物镜确定要观察的目标,将其移至视野中央。转动转换器,把低倍物镜轻轻移开,原位置小心换上高倍物镜。再用粗调节器徐徐将镜筒距离调整,至视野中出现物象,然后用细调节器调节到看清物象止。(用高倍物镜工作距离较短,操作要十分仔细,以防镜头碰击玻片)。 
  (2)调焦  在正常情况下,当高倍物镜转正之后,在视野中央即可见到模糊的物像,只要向反时针方向略微调动细准焦螺旋,既可获得清晰的物像。 
  在换上高倍物镜观察时,视野变小变暗,要重新调节视野亮度,可升高聚光器或利用凹面反光镜。 
5、油镜的使用: 
  高倍镜下观察的标本,如果放大倍数还不够,可用油镜,换用前,同样要先在高倍镜下观察,把要观察的部分放在视野的正中央。观察到清晰的物象之后,在盖玻片上表面的中央滴一小滴香柏油,再换上油镜头,使油镜头与香柏油接触,然后由目镜观察 。一边观察,一边用手稍移动细调节器(切忌用粗调节器)以看清物象。用油镜观察完毕后,转开油镜,必须用擦镜纸点二甲苯擦去镜头上的香柏油。下降镜筒,直立反光镜,使光学部件的光线不再对在一条直线上。 
  应当了解的是,在显微镜中观察到的物象是倒象,因此移动玻片时,应注意移动方向。如果要使物象左移动就要向右移动玻片,同样要使物象向前移动,就要向后移动玻片。 
6、使用后的整理 
  观察结束,应先将镜筒升高,聚光器下降,再取下切片,然后转动转换器,使物镜与通光孔错开,做好清洁工作。清洁完毕,再下降镜筒,使两个物镜位于载物台上通光孔的两侧,呈“八”字形,将反光镜转至与载物台垂直,罩上防尘罩,仍用右手握住镜臂,左手平托镜座,按号放回镜箱中。 

三、显微镜的保养(MAINTENANCE): 
  显微镜是一种精细的仪器,是我们在实验,研究和教学中不可或缺的辅助工具。所以,我们在使用时和使用后就更要好好的维护和保养, 让它更好的为我们的工作学习服务。 
  1、使用完毕后,仪器应装回木箱,并放在干燥、清洁、通风良好和无酸碱蒸气的地方。 
  2、显微镜已经过仔细地检验和调校,物镜和目镜不要自行拆卸。如有任何灰尘,先用吹风球吹去,然后用软毛刷拂除。油污可用清洁的细布蘸二甲苯擦试。 
  3、显微镜各机械部分如沾附灰尘,也应先将灰尘拂除,然后用干而清洁的软细布擦拭干净。无漆部分应随即涂上薄薄一层无腐蚀性的润滑剂。 
  4、精调焦机构如发现太松或太紧时,可用一手握紧一只旋钮,一手旋转另一只旋钮,太紧时将旋钮旋松,太松时将旋钮旋紧。这样适当地调节,可使升降机构松紧适宜。 
  5、物镜用后必须装入物镜盒中,以防碰损和沾污。 
  6、100X物镜用完后应立即用清洁的软细布蘸二甲苯擦拭干净。 
  7. 物镜和目镜的生霉生雾的处理办法! 
  准备 30% 无水乙醇 + 70% 乙醚,将不同的镜头单独分开放置干燥剂器皿中,最好用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭,注意不能用力擦,以防止损伤镀膜层。 油镜当时就要清洗,特别是 100X 的油镜,处理不当的话,前片容易浸油或开胶。 目镜可以自己拆下来清洗, 16X 目镜注意别装反了,前片凹面在上。物镜不要随便拆下。 指针不要用头发来做,易弄脏镜头,厂家可配备一个指针。一般 2 个月最好能集中保养一次。显微镜多时,各个镜头要标号以免弄错了搭配。 
  8. 透镜的清洁 
  清洁灰尘用用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来,注意轻 柔 慢 缓。有些较顽固的污迹如油迹,指纹等,可以用干净的软棉布,棉花棒镜头纸等蘸上无水酒精轻轻的擦去。如果是从油镜上擦去浸油,应用镜头纸,软棉布或纱布,蘸上二甲苯轻轻擦去。注意,不要用二甲苯清洗双目镜筒底部的入射透镜或目镜内的棱镜表面。因为纯酒精和二甲苯容易燃烧,在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。防患于未然。 
  9. 油漆和塑料表面的清洁 
  我们反对使用有机溶剂(如酒精,乙醚,稀释剂等)来清洗仪器的油漆和塑料表面,建议使用硅布,还有更顽固的污迹可以使用软性的 清洁剂来清洗。塑料表面只需要用软布蘸水就可以了清洗了。 
  10. 显微镜闲置的处理 
  当显微镜在放假等长时间不使用的情况下,请您用塑料罩盖好,并储放在干燥的地方防尘防霉。同时我们强烈建议您将物镜和目镜保存在干燥器之类的容器中,并防些干燥剂。 
  11. 定期检查 
  显微镜的精细和贵重,要求我们要更加的爱护它。为了保持它的性能的稳定,我们建议您定期的检查,保养。

 

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